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雷帕霉素对人CD4~+CD25~+调节性T细胞体外扩增的影响
【出 处】:
人调节性T细胞
体外扩增
雷帕霉素
【作 者】:
郝俊
[1,2] ;
曹国番
[1,2] ;
杨洁
[2] ;
杨懿铭
[2] ;
李振华
[1,2] ;
杨燕
[2,3] ;
范华骅
[2]
【摘 要】探讨有效的体外扩增人CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的方法以及雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对人CD4+CD25+Treg细胞体外扩增的影响。采用免疫磁珠分离人外周血的CD4+CD25+Treg,并将实验分为3组:第1组在CD4+CD25+Treg培养体系中加入200U/mlII。-2和包被CD3/CD28单克隆抗体的磁珠;第2组培养体系中除加入100nmol/LRAPA以外,其余与第1组相同;第3组是CD4+CD25+Treg培养第12天后,将细胞进一步分选获取CD4+CD25+CDl27Treg再继续培养,培养体系与第2组相同。实验结果显示,加RAPA培养的CD4+CD25+Treg细胞扩增效率比不加RAPA的低,但细胞的纯度明显提高(92%US 65%)。而加RAPA培养的第2、3组CD4+CD25+Treg细胞在纯度上没有明显的差异。加RAPA培养的CD4+CD25+Treg细胞扩增后保持其无能状态。体外抑制实验显示体外扩增的CD4+CD25+Treg细胞对CD4+效应T细胞增殖均有明显的抑制作用,而且加RAPA扩增的Treg细胞表现出更强的抑制功能。另外,与第1组体外扩增的Treg细胞相比,加RAPA扩增的Treg细胞表达低水平的IL-2和IFN-λ。实验证明雷帕霉素抑制了CD4+CD25+Treg细胞中混杂的CD4+效应T细胞的扩增,使用雷帕霉素可以提高体外扩增CD4+CD25+Treg细胞的纯度及其免疫抑制功能。
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