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抗人DR5单克隆抗体诱导HL-60细胞凋亡机制
【出 处】:
死亡受体5
单克隆抗体
凋亡
半胱天冬酶
【作 者】:
李淑莲
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王赟
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张舒曼
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王靖
【摘 要】探讨抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6)诱导白血病细胞系HL-60细胞凋亡的可能机制。MTT法检测mDRA-6对HL-60细胞的生长增殖的影响,以及Caspase8、10、3抑制剂对mDRA-6抑制HL-60细胞生长增殖的影响;琼脂糖凝胶电泳检测HL-60细胞DNA片断化降解;Westernblot检测mDRA-6对HL-60细胞Caspase8、10、3的激活改变。结果发现,mDRA-6呈时间、浓度依赖性地抑制HL-60细胞的生长增殖,10mg/L的mDRA-6作用HL-60细胞6h、8h和10h,细胞增殖抑制率分别为23.96%、44.10%和50.28%;琼脂糖凝胶电泳显示,10mg/L的mDRA-6作用6h,HL-60细胞呈现凋亡细胞特有的DNA梯形条带;Westernblot检测结果发现,mDRA-6作用HL一60细胞不同时间,Caspase8均只有酶原条带出现,无激活片段产生,而Caspase10和Caspase3显示明显裂解片段产生,并随mDRA-6作用时间延长而增多;预先使用15/lmol/L的Caspase10及Caspase3抑制剂孵育细胞1h,能够使mDRA-6对HL-60细胞的生长抑制率分别降低64.15%(t=10.13、P〈0.01)和53.69(t=8.93、P〈O.01)%,而预先使用15μmol/L的Caspase8抑制剂孵育细胞1h,mDRA-6对HL-60细胞的生长抑制率仅降低4.40%(t-0.52、P〉O.05)。以上实验结果提示,mDRA-6通过激活Caspase10启动凋亡信号分子,诱导白血病HL-60细胞凋亡。
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