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乳腺癌组织中ERα mRNA和PR mRNA检测方法的建立和应用
【出 处】:
雌激素受体α
孕激素受体
乳腺癌
实时荧光定量RT-PCR
【作 者】:
叶伟民
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何金
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何铭珺
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杨洁
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徐毅
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陆慧琦
【摘 要】建立测定雌激素受体α(ERa)tuRNA和孕激素受体(PR)mRNA的实时荧光定量RTPCR,探讨两者在乳腺癌组织及良性乳腺肿瘤组织中的表达水平。分别以pMDl8-ERα和pMDl8-PR质粒为定量模板,用循环阂值(Ct)定量起始模板,在荧光TaqMan方法的基础上建立了测定ERamRNA和PRmRNA的实时荧光定量RT—PCR,并分别测定48例乳腺癌组织及28例良性乳腺肿瘤组织中ERamRNA和PRmRNA的表达水平。ERamRNA和PRmRNA测定的线性范围为103~108copy/μgRNA;ERamRNA和PRmRNA高值和低值的批内和批间变异系数(cⅥ在5.07%~11.28%之间。ERmRNA在乳腺癌组织中的表达量为6.76×10。copy/μgRNA(4.17×10。,9.34×10。),良性乳腺肿瘤组织中的含量为1.54×10μcopy//μgRNA(1.02×10。,2.06×10。),乳腺癌组织的表达量高于良性组织(P%0.05);PRmRNA在乳腺癌组织中的表达量为1.02×10。copy/μgRNA(6.81×10。,1.36×10。),良性乳腺肿瘤组织中的含量为4.93×10。copy//μgRNA(3.21×10。,6.65×10。),两者表达无明显差异(P〉0.05)。ERαmRNA和PRmRNA在乳腺癌和良性乳腺肿瘤组织中的表达存在相关性。我们建立的测定ERamRNA和PRmRNA的实时荧光定量RT—PCR灵敏、稳定、重复性好,可供临床检测和研究。ERamRNA和PRmRNA基因表达水平可作为预测治疗效果及判断预后的重要指标。
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