【出 处】： TIGIT 树突状细胞 IL-10 慢病毒

【作 者】： 陈茜 [1] ; 高义 [2] ; 黄敏 [3] ; 阿孜古丽·艾海提 [1] ; 陈忠华 [2] ; 刘喆隆 [1] ; 余学锋 [1] ; 何文涛 [1]

【摘 要】本文旨在构建表达小鼠TIGIT胞外段与人IgG-Fc段融合基因TIG-Fc的慢病毒载体，验证TIG—Fc蛋白的功能，为进一步研究其免疫调节作用奠定基础。具体方法是将TIG-Fc融合基因克隆到pLOX载体质粒上，鉴定正确连接的克隆TIG-Fc—pLOX，并与pCMVAR8．2和pMD．G三质粒共转染人胚肾（HEK）293T细胞，收获上清中携带TIG-Fc基因的慢病毒Lenti-TIG-Fc。感染了Lenti—TIG-Fc的293T细胞与内毒素刺激成熟的小鼠树突状细胞（DC）共孵育后，EuSA检测上清中IL-10水平。结果显示成功构建的慢病毒Lenti—TIG-Fc感染293T细胞后，可使其稳定分泌TIG—Fc融合蛋白。融合蛋白可诱导成熟DC分泌IL-10明显增加。