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鉴定慢病毒携带IL-21转导人脐带间充质干细胞及IL-21活性初探
【出 处】:
人脐带间充质干细胞
IL-21
慢病毒
靶向治疗
【作 者】:
张云霞
[1] ;
王净
[1] ;
任慕兰
[1] ;
陈登宇
[1] ;
陈峻崧
[2] ;
王小英
[2] ;
李淼
[2] ;
窦骏
[2]
【摘 要】建立慢病毒携带IL-21转导人脐带间充质干细胞方法,并鉴定IL-21活性。以pRSC-IL-21质粒为模板扩增IL-21基因,插入到pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen中,构建成慢病毒载体pHAGE-IL-21,将其包装为成熟慢病毒感染HEK 293T细胞。Western blot分析重组慢病毒感染hUCMSC中IL-21的表达,FCM法检测培养上清对脾细胞的增殖作用。结果显示正确构建了携带IL-21基因的慢病毒表达载体,包装的慢病毒感染HEK 293T细胞后可见绿色荧光表达。含IL-21慢病毒感染的hUCMSC中可检测到IL-21表达,分泌在培养上清中的IL-21具有促使脾细胞增殖活性。
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