联系我们
微小RNA-7敲减对小鼠脾脏中T淋巴细胞体外功能的影响
【出 处】:
【作 者】:
郑文
[1,2] ;
赵娟娟
[1,2] ;
朱顺飞
[1,2] ;
徐华林
[1,2] ;
雷良玉
[1,2] ;
卢佳
[1,2] ;
贾力
[1,2] ;
褚风云
[1,2] ;
王海嵘
[1,2] ;
徐林
[1,2]
【摘 要】观察微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(Knock down,KD)对小鼠脾脏T淋巴细胞体外功能的影响并探讨其意义。常规分离野生型(wild type,WT)小鼠脾脏T淋巴细胞,经CD3和CD28抗体刺激后,Real-time PCR检测不同时间点(0h;24h;48h)细胞中miR-7的表达变化;进一步用Con A、CD3和CD28抗体刺激miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞,CCK8检测细胞增殖率;Real-time PCR检测miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ和IL-10表达的变化;FACS检测CD4+T和CD8+T细胞的数量变化及CD4+T细胞膜分子CD44、CD62L和IL-4、IFN-γ的表达变化。结果显示,WT小鼠脾脏T淋巴细胞活化后,miR-7的表达水平显著上调(P〈0.05);与WT小鼠相比,在Con A、CD3和CD28抗体作用下miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显增加(P〈0.05);miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α和IFN-γ水平均明显上调(P〈0.05),而IL-10表达显著下调(P〈0.05);FACS检测结果显示CD4+T细胞比例明显上调(P〈0.05),而CD8+T细胞的比例变化不显著(P〉0.05);CD4+T细胞膜分子CD62L水平显著下降,CD69及IL-4、IFN-γ的表达水平均显著上调(P〈0.05)。结果表明,miR-7敲减以后可显著影响小鼠脾脏T淋巴细胞的功能,本实验为后续深入探讨其在T淋巴细胞功能调控中的作用提供实验依据。
相关热词搜索:
上一篇:补肾益气方调控TGF-β1对反复自然流产患者外周血Treg/Th17细胞平衡的影响
下一篇:TL1A促进类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞分泌PGE