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荧光素酶报告基因标记的HBV小鼠模型的建立
【出 处】:
【作 者】:
梁声强
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蔡思齐
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周小芹
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林凯
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罗火桔
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徐忠玉
【摘 要】建立萤火虫荧光素酶(Fluc)为报告基因标记的乙型肝炎病毒(HBV)小鼠模型。通过水动力转染10弘g质粒pGL3CP—Flue—HBV1.2分别导入C57BL/6和BALB/c小鼠肝细胞内,定期取血检测HBsAg和HBV—DNA水平,活体成像检测Fluc在小鼠的表达。在BALg/c小鼠中,血清HBsAg表达水平在转染后第1w内迅速升高,随后快速下降。而在C57BL/6小鼠中,HBsAg表达水平下降较缓慢。血清病毒滴度在转染后第1d平均达到3.89×10^4eopy/ml,在第4d和第7d达到最高,分别为1.61×10^5和1.31×10^5copy/ml,随后开始下降,在转染的第70d仍维持在10^3copy/mi以上。免疫组化检测C57BL/6小鼠肝脏HBcAg的表达,结果显示在转染后第3dHBcAg高水平表达,第135dHBcAg仍有表达,但表达水平降低。活体荧光成像实时检测小鼠肝脏Fluc,结果表明两组小鼠均能持续高水平表达Fluc,转染后第7周Fluc的表达量仍然超过10^6 photon/s。我们建立的报告基因标记的HBV小鼠模型能够稳定表达HBV标志物和Fluc,为进一步进行HBV的疫苗评价提供了基础。
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