【出 处】： AIH 重组抗原 原核表达 酶联免疫吸附试验 免疫诊断

【作 者】： 乔健 [1] ; 姜东林 [2] ; 薛育政 [3] ; 龚芳 [2] ; 李成万 [1]

【摘 要】去唾液酸糖蛋白受体（asialoglycoprotein receptor,ASGPR）是肝细胞膜表面特有的一种内吞性受体,H1是参与内吞功能的主要亚基。自身免疫性肝炎（autoimmune-hepatitis,AIH）患者存在抗-ASGPR的自身抗体。本研究以去唾液酸糖蛋白受体H1亚基在大肠杆菌中诱导表达,用纯化的重组去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位rH1作为检测抗原,建立间接法rH1-IgG-ELISA,检测抗去唾液酸糖蛋白受体IgG抗体,观察其阳性和阴性符合率,并对rH1-IgG-ELISA检测的精确度、灵敏度和特异性进行评价。结果显示制备的rH1重组蛋白纯度在90%以上;以该重组抗原建立的rH1-IgG-ELISA的最佳检测条件为：重组抗原rH1的包被浓度为6μg/ml,血清稀释度1：100,酶标记的羊抗人IgG 1：3000稀释;用rH1-IgGELISA对混合ASGPR阳性和阴性血清的重复检测表明：IgG阳性血清的检测值的变异系数（CV值）为9.9%,IgG阴性血清的CV值为9.7%;灵敏度检测表明血清稀释度在1：50~1：200均可检出阳性;特异性试验的抑制率为63.5%;rH1-IgG-ELISA与总符合率为87.36%,其中阳性和阴性符合率分别为82%（41/50）和93.33%（42/45）。故建立的rH1-IgGELISA具有较好的灵敏性和特异性,与提供的ASGPR阳性血清有较高的符合率,表明该法具有较好的AIH诊断价值,可进一步推广应用。