联系我们
去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位表达及用于自身免疫性肝炎诊断的研究
【出 处】:
AIH
重组抗原
原核表达
酶联免疫吸附试验
免疫诊断
【作 者】:
乔健
[1] ;
姜东林
[2] ;
薛育政
[3] ;
龚芳
[2] ;
李成万
[1]
【摘 要】去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)是肝细胞膜表面特有的一种内吞性受体,H1是参与内吞功能的主要亚基。自身免疫性肝炎(autoimmune-hepatitis,AIH)患者存在抗-ASGPR的自身抗体。本研究以去唾液酸糖蛋白受体H1亚基在大肠杆菌中诱导表达,用纯化的重组去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位rH1作为检测抗原,建立间接法rH1-IgG-ELISA,检测抗去唾液酸糖蛋白受体IgG抗体,观察其阳性和阴性符合率,并对rH1-IgG-ELISA检测的精确度、灵敏度和特异性进行评价。结果显示制备的rH1重组蛋白纯度在90%以上;以该重组抗原建立的rH1-IgG-ELISA的最佳检测条件为:重组抗原rH1的包被浓度为6μg/ml,血清稀释度1:100,酶标记的羊抗人IgG 1:3000稀释;用rH1-IgGELISA对混合ASGPR阳性和阴性血清的重复检测表明:IgG阳性血清的检测值的变异系数(CV值)为9.9%,IgG阴性血清的CV值为9.7%;灵敏度检测表明血清稀释度在1:50~1:200均可检出阳性;特异性试验的抑制率为63.5%;rH1-IgG-ELISA与总符合率为87.36%,其中阳性和阴性符合率分别为82%(41/50)和93.33%(42/45)。故建立的rH1-IgGELISA具有较好的灵敏性和特异性,与提供的ASGPR阳性血清有较高的符合率,表明该法具有较好的AIH诊断价值,可进一步推广应用。
相关热词搜索:
上一篇:胃癌组织IL-17RB的表达及意义
下一篇:人羊水干细胞系的建立及其生物学特性分析