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CIITA基因沉默对小鼠骨髓来源的树突状细胞表型及功能的影响
【出 处】:
CIITA
siRNA
树突状细胞
【作 者】:
吴圆圆
[1] ;
周晓荣
[1] ;
浦丹萍
[1] ;
汤伟
[2] ;
朱轶晴
[1] ;
孙晓雷
[1] ;
张洁
[1] ;
周跃
[2] ;
汪晓莺
[1]
【摘 要】研究MHCII类反式作用因子(CIITA)基因干扰对小鼠骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DC)的表型及功能的影响。体外培养小鼠骨髓来源DC,将CIITAsiRNA通过脂质体法转染DC,实时荧光定量PCR(qPCR)、westernBlot及流式细胞术(FCM)检测转染前后CIITAmRNA、蛋白表达量及MHC—11分子表达;混合淋巴细胞反应检测干扰CIITA基因后的DC对异基因淋巴细胞增殖能力的影响,EusA检测共培养上清中细胞因子IL-4、IFN-γ和IL-10的表达水平。qPCR结果显示,DC转染cIITAsiRNA后,CIITAmRNA与controlsiRNA组相比明显降低;westernblot结果显示转染CIITAsiRNA后,DC中的CIITA的蛋白表达量降低,FCM结果显示,转染的DC表面的MHC—11分子表达降低,同时CD40、CD80/CD86分子表达也有一定的降低;转染CIITAsiRNA的DC,其刺激异基因淋巴细胞的增殖能力与对照组DC相比显著减弱,细胞产生IL-4和IL-10的水平提高而IFN—γ的水平降低。表明CIITAsiRNA通过抑制DC的CIITA基因表达来降低MHCII及共刺激分子CD40、CD80/CD86分子水平,减弱DC将抗原提呈给T细胞的能力,从而使免疫反应处于低激活状态。
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