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一种新型免疫毒素IAB—TAT—BH3的表达、纯化及初步鉴定
【出 处】:
CA125
免疫毒素
表达
纯化
【作 者】:
范鸣
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滕云飞
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虞丽平
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杜冰
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何苗壮
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钱旻
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任华
【摘 要】利用能与CA125结合的间皮素最小活性片段IAB与跨膜肽TAT和凋亡肽BH3连接后,插入至质粒pET32a(+)中,构建成免疫毒素IAB-TAT-BH3融合表达载体pET32a(+)-IAB-TATBH3。将此重组质粒及对照组质粒pET32a(+)-1AB-BH3分别转化E.coli BL 21(DE3),表达后经westernblot验证,获得了相应的可溶性蛋白表达产物。表达菌的裂解上清经镍柱亲和层析、超滤脱盐后,分别收集到高纯度且浓度均大于250μg/ml的融合蛋白。经MTT检测,这两种融合蛋白针对细胞表面表达有受体蛋白CA125的癌细胞并具有抑制其增殖的作用。其中IABTATBH3与对照IAB-BH3相比,具有更强抑制细胞增殖的作用。IAB-TAT-BH3这一新型免疫毒素的表达、纯化及初步鉴定,为CA125阳性癌细胞的靶向治
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