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miR-570对胃癌细胞B7-H1蛋白表达的抑制作用
【出 处】:
miR-570与B7-H1
SGC7901细胞、MDA-MB-435细胞与CHO细胞
重组质粒
双
【作 者】:
杨鹏
[1] ;
朱健洁
[1] ;
孙静
[1] ;
李锐
[3] ;
汪维鹏
[1,2] ;
张学光
[1]
【摘 要】B7-HI是一种重要的负性共刺激分子,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,而微小RNA具有直接的转录后调控作用。本文研究miR-570对B7-HI表达的调控作用。首先将miR-570及其抑制剂anti-miR-570分别转染B7-H1表达阳性的人胃癌细胞SGC-7901和B7-HI表达阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-435,以流式细胞术检测B7-H1分子表达情况;然后构建pcDNA/B7-HI表达质粒与miR-570共转染CHO细胞,以流式细胞术检测CHO细胞上B7-H1分子的表达情况;最后分别构建含B7-HI基因3'-UTR片段和含miR-570作用靶点序列的荧光素酶表达载体与miR-570共转染CliO细胞,用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性。结果显示miR-570能显著抑制SGC-7901细胞和B7-HI基因转染细胞膜上B7-HI蛋白的表达,并能显著抑制荧光素酶表达载体表达的荧光素酶蛋白,而且anti-miR-570能上调MDA-MB-435细胞上B7-HI表达。本研究证明miR-570能显著抑制B7-H1蛋白表达,为通过抑制B7-H1信号通路以增强机体抗肿瘤免疫力的治疗途径奠定了基础。
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