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生物薄膜干涉技术和ELISA法检测抗体药物免疫原性的方法学比较
【出 处】:
西妥昔单抗
EusA
生物薄膜干涉技术
抗抗体
检测
【作 者】:
衡磊
[1] ;
王冲
[2,4] ;
钱卫珠
[3,4] ;
张大鹏
[3,4] ;
王皓
[3,4]
【摘 要】采用生物薄膜干涉技术(BLI)开发快速检测治疗性单抗(抗EGFR单抗,cetuximab)的抗抗体(ADAs)的检测方法。本研究利用ForteBio公司开发的Octet系统,在光纤制成的生物传感器底端覆盖生物分子相容层,偶联配体,形成生物膜层。当分析物结合传感器底端偶联的配体时,生物膜层厚度增加,反射光干涉光谱曲线产生可测量的漂移,从而可以实现对分子间相互作用的实时测量,同时以传统的抗体桥ELISA法作为平行对照。SA(streptavidin)传感器结合生物素化的单抗,用免疫原性试剂孵育血清样品后,利用传感器检测血清样品的ADA。分别应用Bu和EusA两种方法确定cutpoint,并进行剂量反应曲线的分析。研究结果表明BLI快速分析法具有同ELISA法极其相似的免疫原性检测行为,均能准确检测出筛选分析中的20例正常人血清的基线反应值。同时,BLI法在竞争抑制实验中体现出了很高的特异性。与ELIsA相比,BLI技术用于治疗性抗体的临床免疫原性分析,更加省时,快捷,准确,而且可避免低亲和力ADA易受洗板干扰的弊端。因此,BLI技术可能成为抗体药物免疫原性检测的一种新的有效方法。
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