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骨髓间充质干细胞对骨髓CD34^+细胞增殖影响的体外研究
【出 处】:
CD34+细胞
BMMSC
增殖
【作 者】:
王荣
[1] ;
刘瑞风
[1] ;
侯瑞霞
[1] ;
李俊琴
[1] ;
闫鑫
[1] ;
杨元文
[1] ;
潘智慧
[1] ;
尹国华
[1] ;
张静
[2] ;
张开明
[1]
【摘 要】研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC)对骨髓CD34^+细胞增殖的影响,为骨髓CD34^+细胞体外扩增的深入研究提供依据。用MACS进行骨髓CD34^+细胞的分选;用流式细胞术进行CD34^+细胞纯度鉴定;用密度梯度离心法分离引产胎儿骨髓单个核细胞,结合贴壁法进行BMMSC的体外扩增培养;用流式细胞术进行BMMSC表面标志鉴定;用Transwell培养板培养CD34^+细胞与BMMSC;用自动细胞计数仪计数有活性的CD34^+细胞数量;用MTT比色法检测骨髓CD34^+细胞增殖活性。流式细胞术检测结果显示分选所得的CD34^+细胞纯度达到90%以上;流式细胞术检测显示传至第3代继续培养72h后的BMMSC高表达CD44、CD29,而HLA-DR、CD45、CD34表达阴性,说明所培养的BMMSC纯度很高;Transwell培养板培养CD34^+细胞与BMMSC,在倒置显微镜下观察以及自动细胞计数仪计数发现,实验组有活性的CD34^+细胞数量高于对照组(P〈O.05);采用MTT比色法检测骨髓CD34^+细胞的增殖活性,实验组高于对照组(P〈O.05)。以上结果说明BMMSC有促进骨髓CD34^+细胞增殖的作用,这种作用可能与其分泌的细胞因子有关。
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