【出 处】： 鼠 B7-H3 基因转染 协同刺激作用 T细胞

【作 者】： 孙静 [1,2] ; 严茹红 [1,3] ; 顾文超 [1] ; 傅丰庆 [1] ; 张光波 [1] ; 陈旭勤 [1] ; 周迎会 [1] ; 张学光 [1]

【摘 要】小鼠B7-H3作为协同刺激分子的生物学功能至今尚未明确。本文拟通过构建小鼠B7-H3基因的真核表达载体，获取稳定表达小鼠B7-H3基因的细胞株，并进一步通过体外实验研究其对T淋巴细胞体外活化及功能的调节作用。作者运用RT—PCR技术从小鼠肝脏组织中获得全长小鼠B7-H3基因，并构建真核表达载体pIRES2-B7-H3，转染仓鼠细胞株（CHO）。经过G418抗性筛选和亚克隆，获得稳定表达B7-H3的基因转染细胞，并经RTPCR、Western-blot及流式细胞术方法鉴定细胞的表达，采用CCK8、酶联免疫吸附试验（EI。ISA）等方法分析基因转染细胞对T细胞的增殖和IL2、IFN—Y的分泌。本文成功克隆和构建了稳定表达小鼠B7-H3的基因转染细胞B7-H3／CHO，该细胞株和T细胞共培养能有效促进T细胞的增殖，增强其IL-2、IFN-γ的分泌。小鼠B7-H3在T细胞活化过程中可能发挥正性协同作用。