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抑制小鼠骨髓树突状细胞RelB基因诱导免疫耐受的体外研究
【出 处】:
RelB
基因抑制
树突状细胞
免疫耐受
【作 者】:
包杰
[1] ;
王前
[2] ;
郑磊
[1] ;
熊石龙
[1] ;
裘宇容
[1]
【摘 要】采用rmGM-CSF和rmIL-4联合诱导培养小鼠骨髓树突状细胞(bone marrow dendritic cells),经免疫磁珠方法纯化;利用慢病毒载体制备RelB shRNA慢病毒,与小鼠骨髓树突状细胞共培养,经流式细胞术观察树突状细胞表面分子MHCⅡ、CD86和CD40的表达;采用CD3+免疫磁珠分离纯化小鼠T细胞;分别采用四唑蓝(MTT)比色法和液相芯片法检测异基因T细胞增殖的程度以及Th1/Th2细胞因子的分泌水平。此外,实验设LPS-DC组、未处理组和LPS RNAi RelB DC组。发现核因子RelB抑制的树突状细胞表面分子MHCⅡ、CD86和CD40均低水平表达,显著低于LPS-DC表面分子的表达(P〈0.05),且该DC经LPS刺激后(LPS RNAi RelB DC)表面上述3类分子的表达水平仍显著低于LPS-DC组(P〈0.05),与未处理组(immature DC)表面分子表达水平相当。其刺激异基因小鼠T细胞增殖的能力和Th1/Th2分子的分泌水平与未成熟DC组相当。表明抑制核因子RelB的骨髓树突状细胞在体外具有诱导T细胞免疫耐受的能力,是一种新型的致耐受树突状细胞研究方法。
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